飛凡檢測細胞增值能力檢測 ，細胞周期檢測 ，活細胞計數(shù)檢測介紹。

活細胞計數(shù)是指對培養(yǎng)的細胞進行計數(shù)，計數(shù)結果以每毫升細胞數(shù)表示。細胞計數(shù)的原理和方法與血細胞計數(shù)相同。

在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞，總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力，由組織中分離細胞一般也要檢查活力，以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用。復蘇后的細胞也要檢查活力，了解凍存和復蘇的效果。

用臺盼蘭染細胞，死細胞著色，活細胞不著色，從而可以區(qū)分死細胞與活細胞。利用細胞內(nèi)某些酶與特定的試劑發(fā)生顯色反應，也可測定細胞相對數(shù)和相對活力。

常用的有平板菌落計數(shù)法，是根據(jù)每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然后將定量的稀釋液進行平板培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù)，可算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù)。此法靈敏度高，是一種檢測污染活菌數(shù)的方法，也是目前國際上許多國家所采用的方法。使用該法應注意：①一般選取菌落數(shù)在30～300之間的平板進行計數(shù)，過多或過少均不準確；②為了防止菌落蔓延，影響計數(shù)，可在培養(yǎng)基中加入0.001%2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。

廣泛應用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗，是最常用的活菌計數(shù)法。

細胞周期指細胞一個世代所經(jīng)歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。細胞周期是一個重要的檢測參數(shù)，研究細胞周期變化的影響對于腫瘤的發(fā)展及藥物研發(fā)有著重要的作用。例如，已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細胞的生長。

細胞周期內(nèi)有兩個階段最為重要：G1 到 S 和 G2 到 M；這兩個階段正處在復雜活躍的分子水平變化的時期，容易受環(huán)境條件的影響，如果能夠人為地進行調(diào)控，將對深入了解生物的生長發(fā)育和控制腫瘤生長等有重要意義。能夠方便有效地檢測細胞周期的變化，對于藥物研發(fā)和疾病研究等都具有重要的意義。

細胞周期一般有幾種檢測方法，如流式檢測法、BrdU(5~溴脫氧尿嘧啶核苷)摻入法及同位素標記法等，尤其是其中的流式檢測法可適用于大量樣品的細胞周期檢測，能急速的分析單個細胞的多種特性，它是現(xiàn)在最經(jīng)常用到的測定細胞周期的一種很有效的方法，以下就其中的流式細胞儀來進行周期分析和測試。

流式檢測的實驗原理：

1、由于細胞周期各時相的DNA含量不同，因此，可通過特異性與DNA結合染料來檢測細胞內(nèi)的DNA含量來測定細胞周期。

2、流式中常用碘化丙啶(Propidium，簡稱PI)與DNA結合，其熒光強度與DNA含量成正比。

流式細胞儀的實驗步驟：

1、收集細胞 取適量的對數(shù)生長期細胞接種于6cm中，在相應的條件下（如藥物）處理相應時間后，倒去培養(yǎng)基，用胰酶適度消化細胞，離心收集細胞，棄去上清。

2、清洗及固定細胞 用PBS清洗細胞2遍，吸凈離心管殘余的PBS后，加入300μL PBS重懸。

3、洗滌細胞 次日，離心收集細胞，用移液槍吸走上清，然后用1mL PBS重懸細胞并離心清洗2~3遍。

4、RNA酶消化和PI染色 在避光條件下，每個樣品加入1避光 RNase （10mg/mL）和5和mg/m（5mg/mL）混勻后室溫避光條孵育30min。

5、上機檢測 將檢測樣品轉(zhuǎn)移到5mL的流式管后用流式細胞儀檢測細胞周期，采用flowjo或modifit軟件進行DNA含量分析。

飛凡檢測生物依托擁有多年服務經(jīng)驗的技術團隊和先進的儀器設備，并嚴格按照《干細胞制劑制備與質(zhì)檢行業(yè)標準（試行）》中提及的10種必檢項目及檢測要求，快速地為客戶提供全方位的干細胞質(zhì)量檢測服務。

質(zhì)量檢測是為了保證干細胞經(jīng)特定體外處理后對其安全性、有效性和質(zhì)量可控性進行較全面的質(zhì)量檢測，包括但不限以下10各方面：

細胞鑒別：細胞形態(tài)、遺傳學、代謝酶亞型譜分析、表面標志物鑒定、特定基因表達產(chǎn)物鑒定。

存活率及生長活性：活細胞計數(shù)、細胞倍增時間檢測、細胞周期檢測、克隆形成率、端粒酶活性檢測等。

純度和均一性：細胞表面標志物鑒定、遺傳多態(tài)性、特定生物學活性。

無菌試驗和支原體檢測：依據(jù)現(xiàn)行版《中華人民共和國藥典》中的生物制品無菌試驗和支原體檢測流程。

細胞內(nèi)外源致病因子檢測：牛源特定病毒的檢測（如使用過牛血清）；豬源細小病毒檢測（如使用過胰酶等豬源材料等。

內(nèi)毒素檢測：應根據(jù)現(xiàn)行版《中華人民共和國藥典》中的內(nèi)毒素檢測流程。

異常免疫學反應（異體來源）：對人總淋巴細胞增殖、對不同淋巴細胞亞群增殖能力的影響、對相關細胞因子分泌的影響。

致瘤性：免疫缺陷動物體內(nèi)致瘤試驗。

生物學效力試驗：檢測干細胞分化潛能、誘導分化細胞的結構和生理功能、對免疫細胞的調(diào)節(jié)能力、分泌特定細胞因子、表達特定基因和蛋白。

培養(yǎng)基及其他添加成分殘余量檢測：牛血清蛋白、抗生素、細胞因子等殘留檢測。