人甲基CpG結合蛋白2(MECP2) ELISA試劑盒技術提示： 1、混合蛋白溶液時，避免起泡。 2、加校準品與樣本時，每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應該懸臂加樣， 避免交叉污染。 3、合適的溫育時間，和充分的洗滌步驟，是保證實驗結果準確性的必要條件。 4、使用自動洗板機時，加入一個 30 秒浸泡的步驟，可以提高檢測精度。 5、底物溶液為無色液體，保存過程中變?yōu)樗{色，代表底物溶液已經(jīng)失效，不得使用。 6、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致，加入終止液后，藍色底物產(chǎn)物，會瞬間變?yōu)辄S 色。 7、實驗中，用剩的板條，應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。 8、所有液體組分，使用前充分搖勻，嚴格按照說明書標明的時間、加樣量及加樣順序進行溫 育操作。

上海軒澤康生物ELISA試劑盒技術指南：【關于ELISA試驗的穩(wěn)定性問題】

1. 做ELISA實驗時，結果老是重復性不上，相同的材料和相同的操作方法做出的結果就截然不同，上午做時OD在1.5，下午做時就是0.9了，所以都沒有辦法下結論，為什么會差異這么大呀？答：（1）多設平行空孔；請別人代勞，以判斷究竟是否操作問題。（2）對于活性非常高的包被物和酶標記物，如果第、一次選擇的范圍恰好在其平臺位置邊緣。那么在重復的時候每次取樣帶來的微量誤差就很容易導致大的偏差了。特別時線性比較好的原料試劑，這個就很正常了。建議每次取樣的時候只使槍尖一點點位于液面下，以免吸嘴外面沾有少量抗原或者抗體或酶而使結果重復不上。

2.  酶不穩(wěn)定，有何高招？答：（1）保存濃度盡量高些。（2）另外可以添加牛血清蛋白等蛋白保護劑，以避免其被吸附或沉降以及被蛋白酶所降解。（3）加入50%甘油-20℃保存，避免反復凍融。（4）還可以加入防腐劑防止長菌（注意不能使用疊氮鈉，其對HRP活性有很大影響。（5）現(xiàn)在一些公司也有商品化的酶標保護劑供應，可以考慮一下。酶類的穩(wěn)定性與保存方法有很大的關系。干燥的制品一般比較穩(wěn)定，在低溫情況下其活性可在數(shù)日甚至數(shù)年無明顯變化，貯藏要求簡單，只要將干燥的樣品置于干燥器內(nèi)（內(nèi)裝有干燥劑）密封，保持0-4℃冰箱即可。液態(tài)穩(wěn)定性較差，貯藏時應注意以下幾點：1.樣品不能太稀，必須濃縮到一定濃度才能封裝貯藏，樣品太稀易降解、變性。2.一般需加入防腐劑和穩(wěn)定劑，酶常用的穩(wěn)定劑有硫酸銨糊、蔗糖、甘油等，也可加入底物和輔酶以提高其穩(wěn)定性。此外，鈣、鋅、硼酸等溶液對某些酶也有一定保護作用。3.貯藏溫度要求低，避免反復凍融。