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飛凡檢測(cè): 斑馬魚(yú)
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發(fā)布時(shí)間: 2023-12-17 08:15
最后更新: 2023-12-17 08:15
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常用的轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)品系

通過(guò)特異性基因啟動(dòng)子控制下游的熒光蛋白在特定的器官或細(xì)胞中表達(dá)而建立的斑馬魚(yú)轉(zhuǎn)基因系,可實(shí)現(xiàn)對(duì)某一特定器官或細(xì)胞的示蹤。目前已開(kāi)發(fā)和利用的一系列標(biāo)記中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)品系,實(shí)現(xiàn)了炎癥情況下細(xì)胞反應(yīng)的可視化,使得在體內(nèi)三維環(huán)境中追蹤中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的遷移成為可能,為觀察炎癥反應(yīng)提供了獨(dú)特視角。

Mathias等[21]、Renshaw等[22]開(kāi)發(fā)了新型的中性粒細(xì)胞特異性表達(dá)eGFP熒光的轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)Tg(MPO:eGFP),其中性粒細(xì)胞在特異性髓過(guò)氧化物酶(MPO或mpx)啟動(dòng)子的調(diào)控下表達(dá)eGFP。Mathias等[21]利用Tg(MPO:eGFP)斑馬魚(yú)觀察了組織損傷誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng),其特征是損傷發(fā)生時(shí)中性粒細(xì)胞迅速向傷口部位趨化,損傷后期中性粒細(xì)胞向血管系統(tǒng)定向逆行趨化。Renshaw等[22]利用Tg(MPO:eGFP)斑馬魚(yú)首次提出證據(jù)表明抑制中性粒細(xì)胞凋亡與延遲炎癥消退有關(guān)。Hall等[23]建立了新的轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)報(bào)告基因系Tg(lysC::EGFP)和Tg(lysC::DsRED2),利用溶菌酶C(lysC或lyz)啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)熒光蛋白表達(dá),并且報(bào)告基因的表達(dá)模式與內(nèi)源性LysC表達(dá)模式一致,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明熒光蛋白標(biāo)記巨噬細(xì)胞群體,但后來(lái)發(fā)現(xiàn)斑馬魚(yú)Lyz與Mpx共定位,因此該品系應(yīng)作為中性粒細(xì)胞標(biāo)記品系使用。Li等[24]構(gòu)建了可以同時(shí)標(biāo)記巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的斑馬魚(yú)轉(zhuǎn)基因品系Tg(coro1a:eGFP),該品系是eGFP在coro1a調(diào)控序列的驅(qū)動(dòng)下表達(dá)。Coronin 1a是一種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白,其RNA是在白細(xì)胞中被特異性合成的。Li等[24]利用Tg(coro1a:eGFP;lyz:Dsred)斑馬魚(yú)記錄了組織再生過(guò)程中巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的不同行為和功能,Tg(coro1a:eGFP;lyz:Dsred)可以同時(shí)觀察并區(qū)分巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞,綠色熒光標(biāo)記巨噬細(xì)胞,黃色熒光標(biāo)記中性粒細(xì)胞。

目前,中藥已在抗炎領(lǐng)域占有重要地位。在新型冠狀病毒肺炎疫情防治過(guò)程中,連花清瘟制劑[63]、清肺排毒湯[64]等中醫(yī)藥制劑因發(fā)揮良好的抗炎、預(yù)防作用,成為抑制患者病情惡化及增強(qiáng)易感者機(jī)體免疫功能的重要治療方法,且在新型冠狀病毒肺炎患者恢復(fù)及出院后的康復(fù)期中起主導(dǎo)作用,由此可見(jiàn)中藥在抗炎領(lǐng)域具有巨大的發(fā)展?jié)摿Α?/p>

斑馬魚(yú)作為一種新型模式生物,具有體積小、繁殖能力強(qiáng)、發(fā)育快、易于觀察、免疫系統(tǒng)高度保守等優(yōu)勢(shì),隨著技術(shù)和方法的不斷改進(jìn),近年來(lái)斑馬魚(yú)在中藥抗炎領(lǐng)域的應(yīng)用也逐漸深入。斑馬魚(yú)作為一個(gè)完整生命機(jī)體,能夠客觀、全面、系統(tǒng)地對(duì)中藥及其有效成分的抗炎活性進(jìn)行評(píng)價(jià),實(shí)現(xiàn)快速、有效的高通量篩選,同時(shí)也為抗炎中藥作用機(jī)制的研究提供了良好模型。斑馬魚(yú)模型的充分利用將為抗炎中藥的研究提供新思路和新方法,促進(jìn)中藥抗炎領(lǐng)域的發(fā)展,同時(shí)斑馬魚(yú)模型在中藥抗炎領(lǐng)域也將擁有更廣闊的應(yīng)用前景。


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