犬骨橋素(OPN) elisa試劑盒（科研實(shí)驗(yàn)專(zhuān)用）操作步驟：

步驟一：使用前將所有試劑平衡至室溫并充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫以免加樣時(shí)加入大量的氣泡產(chǎn)生加樣上的誤差。步驟二：根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

步驟三：【加樣】加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37攝氏度溫育45分鐘。

步驟四：【洗滌】甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液振蕩30秒，甩去洗滌液用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次，也可以用洗板機(jī)洗滌。

步驟五：每孔加入100ul的HRP輕輕振蕩混勻37攝氏度溫育30分鐘。

步驟六：重復(fù)洗滌步驟。

步驟七：每孔加入底物A、B溶液各50ul，輕輕振蕩混勻，37攝氏度溫育5分鐘，避免光照。

步驟八：取出酶標(biāo)板迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

步驟九：在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

犬骨橋素(OPN) elisa試劑盒技術(shù)小提示：當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí)，盡量避免起沫；為了避免交叉感染，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽；每次孵育時(shí)，請(qǐng)正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性；混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無(wú)色，請(qǐng)避光保存；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍(lán)色；終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致；加入終止液后，孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃；若孔內(nèi)有綠色，則表明孔內(nèi)液體未混勻；請(qǐng)充分混合。